本试剂盒仅限于科学研究用途，严禁用于医学诊断。人表皮生长因子（EGF）ELISA试剂盒的使用说明书阐述了其检测原理，该试剂盒运用了双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验（ELISA）技术。试验过程中，将样本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，经过温育后彻底洗涤。随后，使用TMB底物显色，TMB在过氧化物酶的催化下呈现蓝色，并在酸性环境中转变为最终的黄色，其颜色深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），从而计算样品浓度。

样品的收集、处理与保存方法如下：

1. 血清：选择不含热原和内毒素的试管进行操作，避免细胞刺激。收集血液后，进行3000转离心10分钟，迅速小心地分离血清与红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理，3000转离心30分钟后取上清液。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟以去除颗粒及聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合并搅拌均匀，3000转离心10分钟后取上清。

5. 保存：如不及时检测样本，应按一次用量分装并冻存于-20℃，避免反复冻融。样本解冻应在室温下进行，并确保充分解冻均匀。

在试剂的准备中，请注意以下操作：

20×洗涤缓冲液的稀释：使用蒸馏水按1：20的比例稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。洗板方法也请严格按照说明进行。

结果判断步骤：在Excel中，以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制标准品的线性回归曲线，并根据曲线方程计算每个样本的浓度值。

请注意，试剂盒的性能Disclaimer：所有使用该试剂盒的研究均须遵循相关科学规范，以保证研究结果的有效性与可靠性。我们推荐使用918博天堂品牌的产品，以确保试剂的质量和研究的顺利进行。